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舒筋健腰丸对腰椎间盘突出大鼠血清细胞因子变化的影响

来源:医药卫生网

作者:

2018-08-31 16:41:08

中国中医科学院中药研究所  青岛大学附属医院 2

[摘要]目的:观察舒筋健腰丸对腰椎间盘突出大鼠血清细胞因子变化的影响,初步探索舒筋健腰丸治疗腰椎间盘突出症的作用机理。方法:选择 2012年03月~2013年03月180只SD大鼠作为研究对象;依据实验要求将所有SD大鼠分为6组:双醋瑞因组、舒筋健腰丸低剂量组 、舒筋健腰丸中剂量组、舒筋健腰丸高剂量组、空白组、模型组。完成28天实验后,对每一组大鼠血清细胞因子变化加以检测,最终对检测结果回顾性分析。结果:与模型组相比,舒筋健腰丸低剂量组、舒筋健腰丸中剂量组以及舒筋健腰丸高剂量组,各血清细胞因子水平明显降低,差异显著(P<0.05)。结论:舒筋健腰丸能够显著降低腰椎间盘突出大鼠血清细胞因子水平,从而达到治疗腰椎间盘突出症的作用。

[关键词]舒筋健腰丸;腰椎间盘突出;大鼠;血清细胞因子

腰椎间盘突出症患者典型的临床表现是腰、腿疼痛,严重者可能导致残疾和劳动能力丧失,对患者工作及生活质量带来严重的影响,是骨科最常见疾病之一破裂处突出(脱出),对患者的马尾神经以及神经根产生炎性刺激或物理压迫,从而出现一系列的临床体征以及症状表现。研究表明,局部炎症反应参与了腰椎间盘的退变及腰腿痛的发生,炎性细胞因子水平的增高是导致腰椎间盘突出逐渐加重的生物学机制之一[2]。舒筋健腰丸作为一种中成药,临床上在腰椎间盘突出症、坐骨神经痛、骨关节炎以及骨质疏松等疾病的治疗中广泛应用,疗效明确。本次研究观察了舒筋健腰丸对腰椎间盘突出大鼠血清细胞因子变化的影响,以初

步探索舒筋健腰丸治疗腰椎间盘突出症的作用机理。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择SD雄性大鼠作为研究对象,体质量在182克至200克范围内,由中国中医科学院医学实验动物中心提供。双醋瑞因(胶囊),昆明积大制药有限公司生产。舒筋健腰丸,广州白云山陈李济药厂有限公司生产。酶联免疫吸附测定试剂盒,南京比迪生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 动物模型制造

选择180只健康SD大鼠,施以适应性喂养7天。之后依据实验要求进行腰椎间盘突出症造模:显微镜下以玻璃解剖针在背侧神经根与背根神经节之间纵向剖开2~3厘米,移植鼠尾髓核5mg覆盖在切口处,随后逐层缝合[3]。

1.2.2 分组及用药

完成大鼠模型制造后,依据实验要求将所有SD大鼠分为6组: 双醋瑞因组(30 只):准备双醋瑞因灌胃;舒筋健腰丸低剂量组(30 只):准备低剂量舒筋健腰丸灌胃;舒筋健腰丸中剂量组(30 只):准备中剂量舒筋健腰丸灌胃;舒筋健腰丸高剂量组(30 只):准备高剂量舒筋健腰丸灌胃;空白组(30 只):准备生理盐水灌胃;模型组(30 只):准备生理盐水灌胃。其中控制双醋瑞因应用剂量为 0.009 克/千克;舒筋健腰丸低剂量、中剂量以及高剂量分别为 0.75 克/千克、1.5 克/千克以及 3.0 克/千克;空白组和模型组以同体积生理盐水。用药方法均为 1 次/天,连用28 天。

1.2.3 标本采集

实验结束后,对所有大鼠的腹主动脉血进行采集,控制剂量为2毫升,之后展开离心操作,保证转速为3000转/分钟,时间为 15 分钟,之后对上层血清加以选取,完成标记工作后,于-20℃的环境中进行保存,之后准备进行检测。

1.2.4 检测方法

以酶联免疫法检测大鼠血清细胞因子水平,使用相对应的酶联免疫吸附测定试剂盒分别检测大鼠血清 TNF-α、IL-1β、MMP-13 以及 MMP-1 水平。

1.3 统计学方法

运用统计学软件SPSS20.0 对SD大鼠研究结果加以分析,计量资料(血清细胞因子水平)组间对比以 x ± s 形式完成 t 检验,以 P<0.05 为差异显著,具有统计学意义。

2 结果

2.1 舒筋健腰丸对腰椎间盘突出大鼠血清 IL-1β、TNF-α水平的影响

研究结果显示,舒筋健腰丸低剂量组、舒筋健腰丸中剂量组以及舒筋健腰丸高剂量组的血清细胞因子IL-1β水平、TNF-α水平,明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,舒筋健腰丸高剂量组 TNF-α水平与双醋瑞因组比较,显著差异(见表 1)。

表 1 每组大鼠血清 IL-1β以及 TNF-α水平检测结果对比 ( x ± s ,微克/千克)

注:同 A6 组比较,*P<0.05;同 A1 组比较,#P<0.05。

2.2 舒筋健腰丸对腰椎间盘突出大鼠血清MMP-13、MMP-1水平的影响

舒筋健腰丸中剂量组、舒筋健腰丸高剂量组的血清因子MMP-13、MMP-1 水平明显降低,同模型组比较,差异显著(P<0.05),同时,与双醋瑞因组相比,舒筋健腰丸高剂量组效果更佳,差异有统计学意义(P<0.05)。

表 2 每组大鼠血清MMP-13以及MMP-1水平检测结果对比( x ± s ,微克/千克)

注:同 A6 组比较,*P<0.05;同 A1 组比较,#P<0.05。

3 讨论

腰椎间盘突出症的发病机制比较复杂,目前尚未清楚,发病人群趋于年轻化,是近年来研究领域的热点。研究证明,有众多炎性介质参与的局部炎性反应是出现严重临床症状的主要因素[5]。

现代研究表明,IL-1β(白细胞介素 1β)可以导致局部前列腺素 E2 的增加,前列腺素 E2 是重要的炎症递质[6];TNF-α(肿瘤坏死因子α)参与机体的[7]究表明 TNF-α是导致髓核退变的主要细胞因子, 通过神经纤维损伤和神经内膜[8]蛋白酶家族(MMPs)在椎间盘细胞外基质的降解过程中发挥重要作用[9], 其中,MMP-13 (基质金属蛋白酶-13)的降解效率最高,MMP-1(基质金属蛋白酶-1)的水平与椎间盘退变的等级有正相关性[10]。 因此,本研究选这四个血清细胞因子作为观察指标,以探讨舒筋健腰丸治疗腰椎间盘突出症的作用机理。

舒筋健腰丸由13种中药组成(黑老虎、狗脊、千斤拔、牛大力、金樱子、菟丝子、女贞子、桑寄生、鸡血藤、延胡索、乳香、没药、两面针),具有补益肝肾、强健筋骨、驱风除湿以及活络止痛的作用,临床常用于治疗腰椎间盘突出症、坐骨神经痛、骨性关节炎、骨质疏松等疾病。本研究结果显示,舒筋健腰丸能明显降低腰椎间盘突出症大鼠血清 IL-1β、TNF-α、MMP-13 及 MMP-1 的水平,说明舒筋健腰丸对腰椎间盘突出症发挥治疗作用,与其对血清细胞因子的出现加以抑制具有密切的关系。

综上所述,舒筋健腰丸可能是通过抑制 IL-1β、TNF-α、MMP-13 及 MMP-1等细胞因子的水平,发挥抗炎、镇痛、抑制退变的疗效,从而达到治疗腰椎间盘突出症的作用。

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[参考文献]

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[3]ZHANG JJ, SONG W, LUO WY, et al . Autologous nucleus pulposus transplantation to lumbar 5 dorsal root ganglion after epineurium discission in rats: a modified model of non-compressive lumbar herniated intervertebral disc. Chinese Medical Journal, 2011, 124:2009 ~ 2014

[4]吴稚冰, 马胜林, 孔祥鸣,等. 痰热清注射液经口给药对放射性肺炎大鼠血清细胞因子变化影响的实验研究[J]. 实用肿瘤杂志, 2015, 23(2):107-111.

[5]周嵩,蒋尧传. 炎性因子对腰椎间盘突出症发病机制的研究进展[J].中国医药指南,2013,11(15):77-78.

[6]Kang JD, Stefanovic-Racic M, McIntyre LA, et al. Toward a biochemical understanding of human intervertebral disc degeneration and herniation. Contributions of nitric oxide, interleukins, prostaglandin E2, and matrix metalloproteinases.Spine 1997;22(10):1065-1073

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[8]Rand N,Reichert F, Floman Y, et al. Murine nucleus pulposus-derived cells secrete interleukins-1-beta, -6, and -10 and granulocytemacrophage colony-stimulating factor in cell culture.Spine 1997;22(22): 2598-2601

[9]谢海洋.基质金属蛋白酶-13 在腰椎间盘突出症髓核及血清中的表达研究[D].川北医学院,2015.

[10]周兆明.MMP-1、MMP-3、MMP-13 及 P16 在退变腰椎间盘髓核组织中的表达及

意义[D].东南大学,2015.

(来源:医药卫生网)

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